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延遲體積
我們首先來看對于流動相的影響。
相信絕大多數使用液相的同學都是使用梯度方法,當然也使用泵來在線混合流動相的。我們也知道流動相的比例的改變會改變它的洗脫強度,從而改變樣品的出峰時間和分離度。但是,流動相的比例的改變是需要到色譜柱上面才能對分離產生影響的。
這樣從流動相混合點開始,到色譜柱的柱頭這中間所有的體積,就叫做延遲體積(Delay Volume),因為流動相比例的變化因為這一段體積而被延遲了。
有時候,這個體積也被叫做梯度延遲體積(Gradient Delay Volume)、駐留體積(Dwell Volume),有時候這個Dwell Volume也被翻譯成滯留體積,這個是容易讓人產生混淆的地方,因為這里的滯留是指的流動相的滯留,稍后我們還會講到樣品的滯留。
空隙體積
接下來是體積對于樣品的影響。
大家都知道,樣品一旦進入了液相系統,被流動相帶著往前運動的過程中,自身也會因為熱力學運動產生擴散,所以在等度液相的條件下,越往后出的峰,峰寬一般都越寬。
一般來說,樣品由自動進樣器引入系統,可能經過了自動進樣器內部的一些管路后,通過進樣器到柱溫箱的色譜柱。色譜柱的體積包括了填料的體積、以及填料間空隙的體積。
一般對于多孔硅膠填料的色譜柱來說,填料之間的體積占到了色譜整體體積的60%左右。我們一般把這部分叫做色譜柱的空體積/空隙體積(Column Void Volume)或者填料間體積(Interparticle Volume)。
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