成都SPE柱廠家彪仕奇:普通TLC其的峰容量十分有限,在中藥等成分復雜樣品的分析過程中顯得力不從心,于是,一種更為先進的薄層色譜技術——二維薄層色譜(2D—TLC)應運而生。
二維薄層色譜應當滿足兩個條件:
1)兩個維度的分離機制是相互正交的;
2)在第一維中已被分離開的兩個物質在第二維展開的過程中依然是分離的。
2D-TLC在擴充峰容量提高分離效果的基礎上,幾乎保留了一維色譜的所有優點:采用一次性固定相,樣品通常無需凈化精制,節約分析成本和時問;結果可視化;所需展開劑量少,節約試劑;固定相和流動相選擇范圍廣;所有斑點貯存在薄層板上,可隨時對其重復掃描檢測,得出最佳結果。
二維2D-TLC最常用的模式有兩種:
1)單固定相二維薄層色譜
單固定相二維薄層色譜 (2D—TLC on one absorbent),即薄層板只有一種固定相涂層。樣品在薄層板的一角點狀點樣,在第一個方向上展開, 晾干之后,旋轉90。,在第二個方向上再次展開。為達到較好的分離效果,一般可選擇中等極性的固定相,并在兩個方向上使用不同的溶劑系統,使兩個維度分別為正相展開系統和反相展開系統。當然,理論上也可以在兩個維度上都使用相同的展開系統,但這樣只是相當于延長了展距,對分離效果并無明顯的提升,因此較少被采用。
2) 雙固定相二維薄層色譜
雙固定相二維薄層色譜 (2D—TLC on bilayer plates),即薄層板鋪有兩種不同的固定相涂層,一種涂層為一窄條帶,薄層板的剩余空間鋪滿另一種涂層。樣品在條帶涂層的一端點狀點樣,在第一個方向上展開,晾干之后,旋轉90。在第二種涂層上進行展開。第一維固定相還能起到預濃縮的作用,使第二維展開的條帶更細,展開結果更為美觀。
雙固定相二維色譜也和單固定相二維色譜存在著相同的問題,即兩次展開過程之問的干燥問題,但其問題更為嚴峻,單固定相二維色譜尚可選擇將反相系統在第二維展開,但雙固定相二維色譜的兩個維度已被預制,第一維若為十二烷基硅膠之類的固定相,則只能選擇將反相展開系統作為第一維,無法回避控制含水量的問題。
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